检测试剂盒提供的微孔板上的微孔预包被了氯霉素抗体。标准品中的氯霉素即抗原和样品中的抗原分别与酶标记结合物(酶标记抗原)同时竞争包被抗体上的有限结合位点，形成抗体/抗原、抗体/酶标记抗原复合物。室温孵育，使竞争反应完全。洗涤酶标板，除去游离的反应物。加入底物，在室温下，酶标记结合物上的辣根过氧化物酶催化底物发生显色反应，孵育一定时间使颜色发生大变化。加入终止液使反应终止，同时反应物颜色由蓝转黄。颜色的深度与标准品/样品中的氯霉素含量成反比，使用酶标仪在450nm波长下读取相应的吸光度值。构建标准曲线，计算样品中浓度。
检测试剂盒的注意事项：
1.由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2.溶液为黄色需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
