灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的全部微生物或生物体，即把一切生命的物质全部杀死。

　　常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（超声波、微波）、过滤、清洗和许多无菌水冲洗等办法。化学方法是运用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理等。

　　微生物检查培养基常用的灭菌方法主要是湿热灭菌和过滤除菌。

　　1、湿热灭菌：

　　蒸汽在冷凝时释放出许多潜能，而且蒸汽具有强壮穿透力，蒸汽的湿热损坏菌体蛋白质和核酸的化学键，使酶失活，微生物因代谢妨碍而逝世。湿热灭菌的作用，取决于致死温度和致死时间。致死温度是杀灭微生物的极限温度。致死时间是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。

　　高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基分装后应当即灭菌，应在当天内完结灭菌工作，不行过夜。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力规划，否则有机物质就会在高温下分化，失掉营养作用，也会使培养基蜕变、变色，甚至难以凝聚。

　　2、过滤除菌：

　　一些抗生素及有机物等，遇热容易分化，不能与培养基一同进行高温灭菌，而要运用细菌过滤器滤去其间的杂菌，例如含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基。过滤后的溶液要当即参与培养基中，若为液体培养基，可在培养基冷却至30℃时参与；若为固体培养基，得在培养基凝聚之前（50-60℃）参与，振荡使溶液与其他成分混合均匀。