被激发的细菌在半固体培养基中沿穿刺线增殖和生长。具体而言，当穿孔线扩散时，培养基的透明度降低至动态阳性；清晰的穿刺线和透明的培养基为动态阴性。
培养基的鉴定是指在培养基中加入一定的试剂或化学物质，在培养后进行一些改变，从而区分不同类型的微生物。如用于鉴定大肠杆菌的曙红亚甲基蓝培养基和用于鉴定纤维素分解菌的刚果红培养基。
微生物培养过程中，PH变化曲线与微生物生长曲线有关。从培养开始，随着微生物繁殖的增加，代谢物的积累加快，培养基中的Ph值也迅速变化。是酸还是碱与特定的微生物代谢产物有关。直到细菌生长曲线进入衰退期，细菌代谢趋于停滞，培养基中的代谢物和营养物质不再因微生物代谢而发生变化。这时PH的变化减小，之后不变。酸碱度的变化对微生物培养有很大影响。实践中要不断监测PH值的变化，利用加入缓冲体系或曝气(氧气或二氧化碳或其他)等多种手段，将培养体系的PH值稳定在较好的PH范围内，从而达到微生物培养的目的。
固体培养基的形式有平板、试管斜面和深层培养基。平板主要用于计数微生物。斜面主要适用于纯种培养。深层培养基主要适用于厌氧微生物培养。平板的优点是：1。平板表面光滑，易于接种和涂杆。2.微生物一般只生长在平板表面(厌氧微生物除外)。固体培养基平板表面积大而薄，微生物生长空间大，也节省了培养基。3.平板表面积大，可通过调节接种浓度(或用接种针划线)来适应。
