选择各种实验条件非常重要，包括：
(1)固体载体的选择：许多物质都可以作为固体载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、纤维素等。其形式可以是凹平板、试管、珠子等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。无论哪种载体，使用前都可以进行筛选：用等量的抗原包被，在相同的实验条件下反应，观察显色反应是否均相，判断其吸附性能好不好。
(2)包被抗体(或抗原)的选择：抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度好，PH值一般在9.0-9.6之间。吸附温度、时间和蛋白质含量也有一定影响，一般为418 ~ 24小时。
间接法是检测抗体zui的常用方法。其原理是利用酶标抗抗体检测已与固相结合的被测抗体，故称间接法。操作步骤如下：
(1)将特异性抗原与固体载体连接形成固体抗原：洗涤除去未结合的抗原和杂质。
(2)加入稀释的待测血清：血清中的特异性抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤后，只有特异性抗体保留在固体载体上。血清中的其他免疫球蛋白和杂质，因为不能与固体抗原结合，在洗涤过程中被洗掉。
(3)加入酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，使抗体被酶间接标记。洗涤后，固体载体上酶的量代表特异性抗体的量。例如，为了测定人对某种疾病的抗体，可以用酶标记羊抗人IgG抗体。
(4)加入底物显色：颜色深浅代表标本中被检测抗体的量。
