ELISA(酶联免疫吸附测定，酶联免疫吸附测定试剂盒)法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，不会改变抗体的免疫学特性，也不会影响酶的生物活性。酶标记的抗体可以与吸附在固体载体上的抗原或抗体特异性结合。滴加底物溶液后，底物中的供氢体在酶的作用下可以由无色的还原型变为有色的氧化型，产生显色反应。
因此，是否有相应的免疫反应可以通过底物的显色反应来判断，显色反应的深度与样品中相应抗体或抗原的量成正比。这种显色反应可以通过ELISA(酶联免疫吸附测定，酶联免疫吸附测定试剂盒)检测器进行定量测定，从而将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA(酶联免疫吸附测定，酶联免疫吸附测定试剂盒)成为一种特异而敏感的检测方法。
常用琼脂扩散或免疫电泳法，使抗原和抗体形成沉淀线，用PBS冲洗1天，然后用蒸馏水浸泡1小时，再将琼脂凝胶片浸泡在酶底物溶液中显色，如有应有的显色反应，再浸泡在生理盐水中，颜色仍不褪色，说明偶联物既有酶活性又有抗体活性。
好的偶联物研制出来后，琼扩增效价要在1:16以上。另一种测定方法是用一系列稀释的酶标抗体，用ELISA(酶联免疫吸附测定法，酶联免疫吸附测定试剂盒)直接滴定。该方法不仅可以测量标记效果，还可以测定酶标抗体的浓度。
