通常，以下方法可用于清洗试件：
a .吸收孔中的反应溶液
b .用洗涤液填充板孔。
c静置2分钟，轻轻摇晃。
d吸干孔内液体，或倒出液体，用吸水纸拍干。
E洗的次数一般是3 ~ 4次，有时甚至是5 ~ 6次。
测试片应考虑这些条件：
a、编号：依次对样品对应的微孔进行编号，每块板要有2个阴性对照孔、2个阳性对照孔和1个空白对照孔(空白对照孔不含样品和酶标试剂，其他步骤相同)B、加样：分别在阴性和阳性对照孔中加入阴性对照和阳性对照，然后在待测样品孔中加入样品稀释液，再加入待测样品，将样品加入酶标板孔中。
c、孵育：用密封膜密封平板，37孵育30分钟。
d、配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释30倍备用。
e、水洗：小心的剥去封口膜，弃去液体，甩干，每个孔都灌满洗涤液，静置30秒后弃去。重复这个过程5次，拍干。
抗原的总量可以通过将抗原直接固定在固体载体上并加入酶标记的开始一抗体来确定。这种一抗的特异性非常重要。
优点：操作步骤短，不需要使用二抗就可以避免相互作用反应。待测抗原包被在两种抗体之间，其中一种抗体将抗原固定在固相载体上，即捕获抗体，另一种抗体为检测抗体。这种抗体可以直接用酶标记或者不标记，再用酶标记的二抗来测定。得要仔细选择这两种抗体，以避免对同一抗原结合位点的相互反应或竞争。
