菌落总数试片中含有一种红色指示染料，可使菌落呈现红色便于计数，计算出所有红色菌落，不论大小和颜色深浅。
3m试片菌落计数的适宜计数范围为25~250。
试件的计数面积约为20cm2。每个黄色方框的面积是1cm2。当菌落总数超过250时，为了估计菌落数，可选择一个或几个有代表性的小方块(1cm2)。计算平均菌落数，然后乘以20，得到试片上的菌落数。
当试片上的菌落数过多而无法计数时，记录为“TNTC”。
菌落数量非常多，使整个生长区域呈粉红色，或在生长边缘区域只观察到单个菌落，记为“TNTC”。
菌落数量多，有时菌落分布不均，记为“TNTC”。
可以看到直径较大的菌落并进行计数，但仔细观察会发现计数区域分布着非常密集和微小的菌落，记为“TNTC”。
少量菌株会将试片上的培养基液化，计数区出现粉红色液化区。此时不要记录液化区域的红点，统计未液化区域的菌落数，选取几个有代表性的正方形(1cm2)无液化部分。计算平均菌落数，乘以20。得到结果。
注意颗粒区和样品残渣区。有些样品会含有一些红色残余颗粒。菌落应为红色圆形，而颗粒形状不规则。如果样品以红色颗粒为主(如辣椒粉)，则此类样品的菌落总数不得用3M菌落总数试片检测。
