重庆3M测试片
您当前的位置 : 首 页 > 新闻中心 > 行业资讯

ATCC菌株稳定整合试验中的几个关键因素

2023-04-14

  ATCC菌株是一种具有特殊性质或标志物的培养物,通过选择法或克隆形成法从原始培养物或细胞系中获得。也就是说,ATCC细胞株是由单细胞分离培养或筛选而成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须始终存在于整个培养过程中。


  在ATCC细胞株稳定整合试验中,有几个关键因素:


  外源插入片段的拷贝数量。在大多数情况下,低拷贝甚至单拷贝可以减少人为实验因素的干扰。


  二是整合的可能性,这不仅决定了稳定株筛选的难度,而且有助于人们更容易获得混合稳定株。


  第三,整合位点的转录活动,决定了稳定株中外源片段的表现质量。理想情况是单拷贝,但转录活性较高。


  4)整合后的稳定性。染色体中外源片段的稳定性由不同的整合位点决定,部分区域容易重组或丢失,导致稳定株再次丢失。


  5)使用混合稳定株或获得多个不同的单克隆稳定株。由于稳定整合往往伴随着这种插入失活宿主的内源基因,在实验中使用混合稳定株或比较多个单克隆稳定株可以帮助研究人员获得更多的实验数据。


  一种良好的ATCC细胞株有许多要求:


  产量高,产量高,直接降低固定投资和单一生产成本。


  产品质量符合要求。影响药效和安全性的产品质量。


  稳定性。在生产传代过程中,产量和质量不应有较大变化。一般认为60-90PDL产量的变化不超过30%是可以接受的。


  与生产过程相容。细胞株需适用于大规模生产和放大。


  5.合规性。在构建ATCC细胞株的过程中,应避免接触或使用可能影响安全性的动物源成分或其他成分,以确保单克隆。(clonality)以及整个过程的完整实验记录。


  在运输过程中,冷冻的ATCC细胞株和杂交腐细胞株使用干冰保持低温。收到细胞后,可立即解冻复苏,去除二甲基亚(DSMO0)后进行细胞培养。若不能立即复苏培养细胞,必须将细胞冷冻管存放在液氮罐气相层中。请勿将细胞储存在-130℃以上。若温度不够低,达不到-130℃,细胞活力就会立即下降。


  ATCC细胞株产品附有产品数据清单,包括细胞株信息和详细的操作指南。ATCC可以找到细胞株的所有详细介绍,ATCC也可以下载产品数据清单。此外,产品还附有细胞株具体生产批次的检测报告,包括每个冷冻管道中细胞的数量、无微生物污染的检测结果等批次的具体信息。


标签

最近浏览: