孢子分离法是ATCC菌株
ATCC菌种是从事微生物学和生命科学研究的基本材料。在医学领域,有一套完整的菌种,如制备诊断产品、生产菌苗、研究微生物致病性、药物抑菌试验和药物微生物检测,分为母种(一级)。、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。
工业发酵中的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛,选择具有一定能力的有用菌种。菌种分离首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品,用无菌水稀释,然后涂在适合细菌、放线菌或霉菌生长的琼脂培养基平皿上,倒置在恒温箱中,培养一定时间。平皿上生长的许多单一菌落(单一微生物的集落)分离后分离成各种纯菌株,简称纯菌株,移植到试管斜面培养基上,放入4℃冰箱备用。
孢子分离法是ATCC菌种:
孢子分离法也可以分为以下几种方法:
(1)褶皱涂抹法:选择新鲜、强壮、未开伞、未破裂的子实体,洗净后用0.1%汞或75%酒精表面灭菌2分钟,然后与培养基一起放入接种箱中,经福尔马林熏蒸消毒12~24小时,然后按照无菌操作技术在子实体菌褶皱上涂抹接种环,在培养基上划线接种涂抹后带孢子的接种环。
(2)孢子印刷采集法:将带有细菌的载玻片、试纸或黑布放在新鲜、未开伞或未开裂的子体褶皱下。24小时后,孢子落下,形成印记(即孢子印刷)。然后,用接种环或玻璃棒蘸取孢子,在平面或斜面培养基上接种,恒温培养,得到纯菌种。
(3)孢子收集器采集方法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下面是一个直径约25厘米的搪瓷盘。盘内垫4~6层纱布,中间放一个直径9厘米的培养皿。大盖口朝下,小盖口朝上,口朝上。然后,在上面的小培养皿上放一个铅丝绕成的三角架,然后用棉塞盖上带孔的玻璃钟罩。zui后,用纱布将整个孢子收集器包裹起来,放入高压灭菌锅或蒸笼中灭菌2小时。
孢子收集器灭菌消毒后,放入无菌室或无菌箱中。然后,用小刀切割1块4~5厘米大小的子实体,插入收集器内的三角架顶部(如果没有孢子收集器,也可以用培养皿代替)。然后在24~26℃的温度下培养24小时,在培养皿中可以看到白色粉末,即孢子。此时,孢子收集器可以移动到接种箱中,取出培养皿,盖上,在培养皿中加入10~20毫升无菌水,使孢子散落在这里,成为孢子悬浮液。然后,用无菌注射器或吸管将孢子悬浮液注入每个体温度为4~24~2。