3M检测片操作

1.固体

以无菌操作将25 g样品加入到225mL的稀释液(磷酸盐缓冲液或0.1%蛋白胨水)中，8000r/min均质2min(或放入无菌均质袋中，用均质器拍打2min),制成1:10样品匀液。

2.液体

取25 mL样品原液，放入装有225 mL,稀释液的无菌玻璃瓶中，以30cm幅度，7s内振摇25次，制成1:10样品匀液。将上述匀液做10倍系列梯度稀释，根据样品的污染程度，选择适宜的2个-3个连续稀释度，每个稀释度接种2张测试片。

将PYM检验测试片放在平坦的实验台上，揭开上层膜，用移液器将1ml样液加到测试片的中央，轻轻覆盖上层膜，用压板平稳压下，使其均匀覆盖在测试片的圆形培养面积上，拿起压板，静置至少1min,使培养基凝固。

将测试片的透明面朝上放置于培养箱内，堆叠不能超过20片，在25℃-28℃下培养3d-5d。

培养3d后观察计数，如果5d后，测试片上的菌生长过快，出现边缘模糊的菌落，就用3d的计数结果作为估计菌落数。在PYM测试片上，颜色均匀一致，灰白色到蓝绿色或粉红色，没有暗色中心，边界明显的小型隆起菌落计为酵母菌。颜色多样(棕色、米色、橙色、蓝绿色等)、中心颜色深暗的大型或小型扁平扩散菌落计为霉菌。